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　　PCR實(shí)驗(yàn)用pcr管可以重復(fù)使用嗎

　　常規(guī)高精度PCR/qPCR實(shí)驗(yàn)不建議重復(fù)使用PCR管?，僅在低要求定性預(yù)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景下，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格處理可有限度不重復(fù)使用，強(qiáng)行復(fù)用極易引發(fā)交叉污染、擴(kuò)增失敗等問(wèn)題。

　　不推薦重復(fù)使用的原因

　　交叉污染風(fēng)險(xiǎn)高?：PCR反應(yīng)對(duì)核酸殘留極其敏感，哪怕納克級(jí)的前一次擴(kuò)增產(chǎn)物殘留，都會(huì)直接導(dǎo)致下一次實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，陰性質(zhì)控失控。

　　密封性能不可逆下降?：PCR管經(jīng)過(guò)多次95℃高溫變性循環(huán)后，管蓋與管口的咬合精度會(huì)下降，后續(xù)上機(jī)時(shí)極易出現(xiàn)反應(yīng)液高溫?fù)]發(fā)，體系體積失衡，直接導(dǎo)致擴(kuò)增效率驟降。

　　溫度傳導(dǎo)精度受損?：超薄壁PCR管反復(fù)受熱循環(huán)后，管壁會(huì)出現(xiàn)輕微形變，無(wú)法和PCR儀金屬模塊貼合，局部溫度傳導(dǎo)滯后，引發(fā)孔間擴(kuò)增均一性變差，qPCR的CT值偏差會(huì)超過(guò)1個(gè)循環(huán)。

　　僅可有限復(fù)用的特殊場(chǎng)景

　　僅在無(wú)高價(jià)值樣本、僅做粗略定性預(yù)實(shí)驗(yàn)、對(duì)結(jié)果精度要求極低的場(chǎng)景下，高質(zhì)量醫(yī)用級(jí)PP材質(zhì)PCR管可經(jīng)過(guò)嚴(yán)格處理后重復(fù)使用1~2次：

　　實(shí)驗(yàn)后立即用去離子水反復(fù)沖洗管體3次，再用0.1% DEPC水浸泡過(guò)夜，121℃高壓滅菌30分鐘，60℃烘干后使用

　　復(fù)用的PCR管僅能用于普通非熒光終點(diǎn)法PCR，絕對(duì)禁止用于qPCR、臨床檢測(cè)、低拷貝樣本擴(kuò)增等高精度實(shí)驗(yàn)

　　復(fù)用必守的安全線

　　絕對(duì)禁止將復(fù)用PCR管用于提取產(chǎn)物、臨床樣本、低拷貝模板的擴(kuò)增，一旦出現(xiàn)氣溶膠污染，整個(gè)分子實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境消殺成本遠(yuǎn)高于耗材節(jié)省的費(fèi)用。

　　重復(fù)使用次數(shù)嚴(yán)禁超過(guò)2次，超過(guò)次數(shù)的管體即使肉眼無(wú)變形，內(nèi)部也會(huì)出現(xiàn)應(yīng)力裂紋，極易上機(jī)后漏液損壞PCR儀模塊。

　　光學(xué)平蓋的qPCR專用管絕對(duì)不能復(fù)用，管蓋表面的光學(xué)涂層經(jīng)過(guò)高溫和酒精擦拭后會(huì)被破壞，直接導(dǎo)致熒光信號(hào)采集失真，熔解曲線無(wú)法識(shí)別。熒光定量管

　　注：以上科研產(chǎn)品資料供參考!

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