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　　ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，數(shù)據(jù)結(jié)果如何正確解讀?

　　ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，需先確認(rèn)實(shí)驗(yàn)有效性，再結(jié)合檢測(cè)類型完成結(jié)果解讀，步驟如下：

　　一、先驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性

　　檢查標(biāo)準(zhǔn)曲線?：定量實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)?R2需≥0.98?，優(yōu)先用四參數(shù)對(duì)數(shù)擬合，否則結(jié)果可信度不足。

　　核對(duì)對(duì)照孔?：陰性對(duì)照OD值不能過高，陽性對(duì)照需出現(xiàn)明確信號(hào)，無信號(hào)說明實(shí)驗(yàn)體系失效。

　　評(píng)估復(fù)孔精度?：復(fù)孔間變異系數(shù)CV需<10%，超出則提示操作誤差過大。

　　二、按檢測(cè)類型解讀結(jié)果

　　定性檢測(cè)?：將樣本校正OD值(樣本OD-空白OD)和試劑盒標(biāo)注的?Cut-off臨界值?對(duì)比，大于臨界值為陽性，小于則為陰性，臨界附近樣本建議重復(fù)檢測(cè)。

　　半定量檢測(cè)?：通過梯度稀釋得到能產(chǎn)生陽性反應(yīng)的最高稀釋倍數(shù)即效價(jià)，效價(jià)越高代表樣本中目標(biāo)物反應(yīng)能力越強(qiáng)。

　　定量檢測(cè)?：用校正OD值代入合格的標(biāo)準(zhǔn)曲線算出濃度，若樣本提前稀釋，最終結(jié)果需乘以對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù);OD值超出曲線范圍的樣本，調(diào)整稀釋倍數(shù)后重測(cè)。本生BUNSEN 試劑盒

　　三、ELISA結(jié)果判讀核對(duì)清單

　　1、實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有效性核對(duì))

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線?R2 ≥ 0.99?，OD值隨濃度梯度有序下降，無跳點(diǎn)

　　空白對(duì)照OD值 ?< 0.2?，無異常顯色

　　陽性對(duì)照結(jié)果落在試劑盒給定參考范圍內(nèi)，P/N值≥2.1

　　陰性對(duì)照OD值接近空白，無明顯偏高，提示無非特異性強(qiáng)結(jié)合

　　所有試劑均在有效期內(nèi)，無混用不同批次試劑的情況

　　2、樣本數(shù)據(jù)質(zhì)量核對(duì)

　　所有樣本復(fù)孔CV值 ?< 15%?，無差異過大的跳孔

　　樣本OD值全部落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)，無“爆表"或接近0的值

　　3、常見異常快速排查

　　全板無顯色：優(yōu)先檢查酶標(biāo)物活性、底物是否漏加、酶是否失活

　　整板背景過高：排查封閉是否充分、洗滌次數(shù)是否達(dá)標(biāo)、樣本是否有干擾物

　　復(fù)孔差異大：檢查加樣是否帶氣泡、槍頭是否堵塞、孵育是否有蒸發(fā)差異

　　假陽性/假陰性：確認(rèn)樣本是否需要稀釋、是否存在交叉反應(yīng)、目標(biāo)物是否低于檢測(cè)下限

　　注：以上科研產(chǎn)品資料供參考!

　　本生BUNSEN一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。